小蝉草菌丝体及胞外多糖液体发酵的生产方法
申请公布号:CN105567570A
申请号:CN201510972714.3
申请日期:2015.12.23
申请公布日期:2016.05.11
发明人:林群英;孙晓明;张卫明;吴亮亮;张锋伦;吴素玲
分类号:C12N1/14(2006.01)I;C12P19/04(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N
主分类号:C12N1/14(2006.01)I
地址:210042 江苏省南京市玄武区蒋王庙4号
摘要:本发明涉及生物技术领域,公开了一种小蝉草菌丝体及胞外多糖液体发酵的生产方法。以一种小蝉草菌种为出发菌株,通过液体深层发酵,获得菌丝体和胞外多糖。斜面试管菌种于无菌条件下经研磨后,接入液体培养基中制备成液体菌种,再用于液体深层发酵,经过振荡培养或搅拌培养后,获得培养物,利用离心或过滤等方法分离菌丝体和培养液,可获得菌丝体(干重)5-8 g/L。培养液经超滤或乙醇沉淀后获得胞外多糖,得率为0.5-1.2g/L。利用以上工艺可进行小蝉草菌丝体和胞外多糖的生产,具有较高的开发价值。
主权项:一种小蝉草(<i>Cordyceps</i><i> sobolifera</i>)菌丝体及胞外多糖的液体培养方法,其特征包括以下的步骤:第一步: 将小蝉草接种在PDA培养基上,20‑25<sup>o</sup>C下进行暗培养,使菌落直径长至4‑6cm,得到斜面菌种;第二步:第一步得到的斜面菌种,在经灭菌的研钵里,加入适量无菌水进行研磨,接种至液体种培养基,20‑28<sup>o</sup>C下振荡培养,培养7‑10天,至菌丝球充满全部培养基,得到液体菌种,所述的液体种培养基pH6.0‑6.5,每1000mL培养基中含有葡萄糖10‑20g, 蛋白胨1‑5g,牛肉浸膏1‑4g,酵母浸膏0.5‑1g;第三步:将第二步得到的液体菌种接种到液体培养基进行培养,所述的生产用液体培养基pH5.0‑8.5,每1000mL培养基中含有葡萄糖10‑20g, 蛋白胨1‑5g,牛肉浸膏1‑4g,酵母浸膏0.5‑1g,其余为水;第四步:第三步的液体培养可采用两种方式进行,一为振荡培养,另一为搅拌培养。振荡培养方式:将以上液体菌种(步骤2)按接种量5%‑15%(V/V)的比例,接种至液体培养基(同菌种液体培养基GPBY),100‑180r/min,培养4‑7天,至菌丝球充满全部培养基;搅拌培养方式为按比例接入适量的液体菌种后,利用磁力搅拌器进行培养,培养室温度设置为20‑28<sup>o</sup>C下,培养时间4‑7天;第五步:将第四步中的培养物进行菌丝体和培养液的分离,采用离心法或过滤法收集菌丝,菌丝(湿重)得率为70‑100g/L;在40‑60<sup>o</sup>C下烘干菌丝,菌丝(干重)产率5‑8 g/L;离心得的上清液或过滤得的滤液直接加入适量酒精进行多糖沉淀,或进行浓缩后再进行多糖沉淀,最后利用离心的方法收集多糖,多糖经40‑50<sup>o</sup>C下烘干或冷冻干燥,得率为0.5‑1.2g/L。
DEVICE FOR DRIVING AND ROTATING WHEELS FOR WHEELCHAIR
TRANSMISSION SYSTEM FOR VEHICLE
ANGULAR VELOCITY SENSOR ELEMENT, ANGULAR VELOCITY SENSOR AND ELECTRONIC APPARATUS
FOREIGN LANGUAGE BROADCAST EDITING SYSTEM, TRANSLATION SERVER, AND TRANSLATION ASSISTING METHOD
SHOCK-ABSORBING DEVICE AND VEHICLE
SUBTITLE SENDING DEVICE AND SUBTITLE EDITING METHOD OF THE SAME
STEERING WHEEL WITH AIRBAG DEVICE
VIDEO RECEIVING SYSTEM, VIDEO RECEIVING TERMINAL AND BIDIRECTIONAL REMOTE CONTROLLER
VIDEO PROCESSING APPARATUS AND VIDEO PROCESSING METHOD
PHOTOGRAPHY APPARATUS DEVICE AND METHOD
METHOD OF MANUFACTURING PIEZOELECTRIC VIBRATION PIECE