一种葡萄糖氧化酶酶活性的测量方法,申请号CN201610142392.4-传众专利搜索

一种葡萄糖氧化酶酶活性的测量方法

申请公布号：CN105586388A

申请号：CN201610142392.4

申请日期：2016.03.14

申请公布日期：2016.05.18

申请人：

河南大学

发明人：洪军;耿方勇;肖保林

分类号：C12Q1/54(2006.01)I;C12Q1/28(2006.01)I;C12Q1/26(2006.01)I

主分类号：C12Q1/54(2006.01)I

代理机构：

郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104

代理人：刘建芳;杨海霞

地址：475001 河南省开封市明伦街85号

摘要：本发明涉及一种葡萄糖氧化酶酶活性的测量方法，具体为：1）配置pH值为5.8的磷酸盐缓冲液，然后室温下依次加入辣根过氧化物酶液、葡萄糖氧化酶液、愈创木酚和葡萄糖溶液；2）采用紫外可见光分光光度计进行时间扫描，获得产物四邻甲氧基连酚的吸光值随时间的变化数据；3）根据朗伯比尔定律将四邻甲氧基连酚的吸光值换算为浓度，然后以时间为横坐标，浓度为纵坐标，在excel中作散点图，添加趋势线，趋势线斜率即为四邻甲氧基连酚的生成速率，该生成速率乘以系数4即得到葡萄糖氧化酶催化葡萄糖的反应速率，再根据酶活力单位定义进行换算即得到葡萄糖氧化酶酶活性。该方法具有操作简便，反应现象明显，灵敏度高，重复性好等优点。

主权项：一种葡萄糖氧化酶酶活性的测量方法，其特征在于，包括如下步骤：1）配置pH值为5.8的磷酸盐缓冲液，然后室温下依次加入辣根过氧化物酶液、葡萄糖氧化酶液、愈创木酚溶液和葡萄糖溶液；2）当加入葡萄糖后酶促反应开始，此时开始计时，在吸收波长为470nm条件下采用紫外可见光分光光度计进行时间扫描，获得产物四邻甲氧基连酚的吸光值随时间的变化数据；3）根据朗伯比尔定律将四邻甲氧基连酚的吸光值换算为浓度，然后以时间为横坐标，浓度为纵坐标，在excel中作散点图，添加趋势线，趋势线斜率即为四邻甲氧基连酚的生成速率，该生成速率乘以系数4即得到葡萄糖氧化酶催化葡萄糖的反应速率，再根据酶活力单位定义进行换算即得到葡萄糖氧化酶酶活性。