从浒苔中分离纯化制备酚酸和生物碱的方法与用途,申请号CN201310649594.4-传众专利搜索

从浒苔中分离纯化制备酚酸和生物碱的方法与用途

申请公布号：CN103636679B

申请号：CN201310649594.4

申请日期：2013.12.06

申请公布日期：2015.01.28

申请人：

淮海工学院

发明人：孙颖颖;王辉;董晓柯;李光成

分类号：A01N65/03(2009.01)I;A01P13/00(2006.01)I

主分类号：A01N65/03(2009.01)I

代理机构：

连云港润知专利代理事务所 32255

代理人：刘喜莲

地址：222000 江苏省连云港市新浦区苍梧路59号淮海工学院海洋学院孙颖颖转

摘要：本发明是一种从浒苔中的分离纯化制备酚酸和生物碱的方法：向浒苔干粉末加入无水甲醇制得蒸干物，再加入蒸馏水制得上清液；将上清液调pH后加入乙酸乙酯多次萃取制得组分ABCD；将组分A的甲醇溶液柱洗脱、将BCD甲醇溶液点样于硅胶GF254上，合并收集相同Rf处条带溶解于丙酮，经离心和减压浓缩，制备到9种组分，其中的3种组分再次以划线法点样于硅胶GF254上进行纯化制备，制备到8种组分。14种组分为生物碱和酚酸。可用于抑制米氏凯伦藻或者中肋骨条藻的生长。本发明方法可操作性强，制得的酚酸和生物碱纯度高，实现了从浒苔中提取制得酚酸和生物碱的突破。该方法制得的多种酚酸和生物碱具有海藻抑藻活性，具有实际应用价值。

主权项：一种从浒苔中分离纯化制备酚酸和生物碱的方法，其特征在于，其步骤如下：(1)将浒苔干粉末加入无水甲醇，常温、黑暗下浸泡，过滤后获得浸提液；减压蒸干，得蒸干物；蒸干物加入蒸馏水，充分振荡，4℃下静置过夜，离心、过滤，去除沉淀，得上清液；(2)将上清液调pH至11，加入乙酸乙酯萃取，所得上层减压蒸干，获得组分A，调节所得下层pH至7，乙酸乙酯萃取，所得上层减压蒸干，得到组分B，再调节所得下层pH至2，乙酸乙酯萃取，所得上层和下层分别减压蒸干，获得组分C和组分D；A、B、C、D4种组分分别溶解于无水甲醇中，制得A、B、C、D4种甲醇溶液；(3)将组分A的甲醇溶液加载于Sephadex LH‑20凝胶柱层析上，以30％、50％、70％、90％和100％甲醇溶液为洗脱溶剂；经薄层层析检测，合并收集洗脱液，减压浓缩，分别在30‑50％、70％和100％甲醇溶液洗脱下，收集到3种组分，记为组分AA、组分AB和组分AC；将组分AA，以及组分B、C、D的甲醇溶液点样于硅胶GF254上，进行薄层层析检测，以体积比为15:3:2的氯仿/丙酮/甲酸为展开剂，展开后，紫外254nm下观察，组分AA出现4个斑点，Rf为0.375、0.688、0.775和0.825，组分B的甲醇溶液出现2个斑点，Rf为0.602和0.851，组分C的甲醇溶液出现1个斑点，Rf为0.843；采用体积比为8:1的氯仿/甲醇为展开剂，紫外254nm下，组分D的甲醇溶液出现2个斑点，Rf分别为0.333和0.575；在此基础上，以划线法多次点样，合并收集相同Rf处条带，重新溶解于丙酮，经离心和减压浓缩，制备到9种组分，依次记为组分AA1、组分AA2、组分AA3、组分AA4、组分B1、组分B2、组分C1、组分D1和组分D2；其中，组分AA2、组分AA4和组分C1再次以划线法点样于硅胶GF254上进行纯化，以体积比为18:1:3的氯仿/丙酮/甲酸为展开剂，制备到8种组分，依次记为组分AA21、组分AA22、组分AA23、组分AA41、组分AA42、组分AA43、组分AA44和组分C11；(4)经化合物定性检测、波长扫描和薄层层析检测，上述组分AA1、组分AA21、组分AA22、组分AA23、组分AA3、组分AA41、组分AA42、组分AA43、组分AA44、组分B1、组分B2、组分C11、组分D1和组分D214种组分中：组分D1和组分D2是生物碱，其余组分为酚酸；分别减压蒸干，即得。