一种发酵黄芪的制备方法及其总皂苷的提取方法
申请公布号:CN104152491A
申请号:CN201410405496.0
申请日期:2014.08.18
申请公布日期:2014.11.19
发明人:秦哲;李建喜;杨志强;王学智;张景艳;王旭荣;王磊;孔晓军;孟嘉仁;张凯
分类号:C12P1/04(2006.01)I;A23K1/16(2006.01)I;A61K36/481(2006.01)I;C12R1/46(2006.01)N
主分类号:C12P1/04(2006.01)I
代理人:高松
地址:730000 甘肃省兰州市七里河区小西湖硷沟沿335号
摘要:本发明提供一种发酵黄芪的制备方法,是将黄芪用非解乳糖链球菌LZMYFGM9,保藏编号CGMCC No.4227的菌株发酵得到的;本发明还提供一种发酵黄芪总皂苷的提取方法,步骤如下:(1)将发酵黄芪用80%~90%乙醇温浸提取,优选用85%乙醇温浸提取;得到醇提发酵黄芪流浸膏;(2)将步骤(1)得到的醇提发酵黄芪流浸膏用水饱和正丁醇萃取,得提取液;(3)将提取液上样于大孔吸附树脂柱吸附,洗脱,收集洗脱液,将洗脱液进行后处理,得到纯化后的发酵黄芪总皂苷。应用本发明的提取方法进一步提高了皂苷的纯度,达到86%~92%。
主权项:一种发酵黄芪的制备方法,其特征在于:步骤如下:将洁净的黄芪生药饮片粉碎后,发酵黄芪,发酵菌株非解乳糖链球菌CGMCC No.4227的菌液浓度为2×10<sup>6</sup>~2×10<sup>8</sup>个/mL,接菌量为4%~5%(占发酵总体积),黄芪用量为8%(黄芪质量:发酵液体积,g:mL),温度38℃~39℃,转速200r/min,pH值5.5~6.5,溶氧量5%~10%,中和剂为6mol/L的NaOH,发酵时间44h~52h,发酵结束后,冻干发酵黄芪液得发酵黄芪产品;优选地,发酵菌株CGMCC No.4227的菌液浓度为2×10<sup>8</sup>个/mL,接菌量为5%(占发酵总体积),黄芪用量为8%(黄芪质量:发酵液体积,g:mL),温度39℃,转速200r/min,pH值6.4,溶氧量10%,中和剂为6mol/L的NaOH,发酵时间48h;优选地,所述发酵黄芪过程中使用的液体培养基由以下重量份数的成分制备完成:乳清粉:24~27份;蛋白胨:2.2~2.4份;葡萄糖:0.5~0.7份;酵母粉:1.4~1.7份;硫酸镁:0.03~0.05份;柠檬酸三铵:0.30~0.50g;硫酸氢二钾:0.30~0.50g;乙酸钠:0.90~1.10g;黄芪粉:80~100份;水:900~1100份;更优选地,所述发酵黄芪过程中使用的液体培养基由以下重量份数的成分制备完成:乳清粉:25.79份;蛋白胨:2.28份;葡萄糖:0.60份;酵母粉:1.56份;硫酸镁:0.04份;柠檬酸三铵:0.40份;硫酸氢二钾:0.40份;乙酸钠:1.00份;黄芪粉:80份;水:1000份。