一种与伊犁马乳用性状相关的SNP标记及其检测方法,申请号CN201310514883.3-传众专利搜索

一种与伊犁马乳用性状相关的SNP标记及其检测方法

申请公布号：CN103740805A

申请号：CN201310514883.3

申请日期：2013.10.25

申请公布日期：2014.04.23

申请人：

刘武军;新疆农业大学

发明人：刘武军;邵勇钢;王琼;莫合塔尔·夏甫开提;孟军;耿明;刘玲玲

分类号：C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

代理机构：

乌鲁木齐新科联专利代理事务所(有限公司) 65107

代理人：欧咏

地址：830052 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市农大东路311号

摘要：本发明提供的一种与伊犁马乳用性状相关的SNP标记及其检测方法,该SNP标记为位于马21号染色体上第29764513位的碱基，此处碱基为G的伊犁马日均产奶量显著高于此处碱基为A的伊犁马,利用分子标记技术，检测待测伊犁马的基因型，根据基因型进行伊犁马产奶量的选育，从而加速新疆专门化乳用马品种的培育。

主权项：一种与伊犁马乳用性状相关的SNP标记及其检测方法，其特征在于：1）提取待测伊犁马的基因组DNA；根据GenBank登录号为BIEC2‑560774的序列，设计合成引物，上游引物为5'‑ GGTTGCTATTCTGGGCTTTG‑3'，下游引物为5'‑TGTGTTGGGATGGACAAAAA‑3' ；扩增片段大小为194bp，最适退火温度为57.1℃；2）以待测伊犁马的基因组DNA为模板，对设计引物进行PCR扩增；反应体系：PCR Mixture 10.0μl，上下游引物各0.4μl，DNA模板1.5μl，加水至总体积20μl；反应条件：94℃预变性5min，94℃变性30s、57.1℃ 30s、72℃延伸1min，循环30次，72℃延伸5min，4℃保存；3）对扩增的PCR产物，进行SSCP检测；其中电泳的电压180 V，电流50 mA，时间10 h；4）选取个体的 PCR产物，送往上海生物工程技术有限责任公司进行DNA测序，判定位于马21号染色体上第29764513位的碱基G的伊犁马日均产奶量显著高于碱基为A的伊犁马日均产奶量。