乙型肝炎病毒阿德福韦酯耐药核酸定量检测试剂盒、检测方法、引物及其探针,申请号CN201110194273.0-传众专利搜索

乙型肝炎病毒阿德福韦酯耐药核酸定量检测试剂盒、检测方法、引物及其探针

申请公布号：CN102304589B

申请号：CN201110194273.0

申请日期：2011.07.12

申请公布日期：2014.01.01

申请人：

武汉百泰基因工程有限公司

发明人：唐景峰;王业富;刘绪

分类号：C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I

主分类号：C12Q1/70(2006.01)I

代理机构：

北京三高永信知识产权代理有限责任公司 11138

代理人：孟阿妮

地址：430223 湖北省武汉市东湖开发区大学园路武汉大学科技园宏业楼五楼

摘要：本发明公开了乙型肝炎病毒阿德福韦酯耐药核酸定量检测试剂盒、检测方法、引物及其探针。该试剂盒含有：荧光定量PCR反应液，其中包括DEPC处理水、具有5’→3’外切活性的DNA聚合酶、dNTPs、10×荧光定量PCR Buffer、含有Mg2+离子的溶液、rt181位点正向引物、rt181位点反向引物、rt181A位点探针、rt181V位点探针、rt181T位点探针、rtN236T检测试剂盒特有的rt236位点正向引物、rt236位点反向引物、rt236N位点和rt236T位点探针；试剂盒中还包括DNA提取液、阴性质控品、工作标准品、阳性质控品和临界阳性质控品。本发明采用实时荧光定量PCR技术定量检测乙型肝炎病毒阿德福韦酯耐药毒株，荧光定量PCR方法避免了PCR延伸的步骤；探针可以标记多种荧光标记，同时还具有特异、灵敏、快速、操作简便的优点。

主权项：一种乙型肝炎病毒阿德福韦酯耐药核酸定量检测引物和探针，包括下述正向引物、反向引物和荧光探针的一组序列：rt181位点正向引物：5'TACAAAACCTTCGGACGGAAA3'rt181位点反向引物:5'AAAGCCCTRCGAACCACTGA3'rt181A探针序列：5'TTCTCHTGGCTCAGTTT3'rt181V探针序列：5'TTCTCHTGGTTCAGTTTA3'rt181T探针序列：5'TTCTCHTGACTCAGTTTA3'；其中，所述荧光探针的5’端和3’端分别用荧光基团修饰；所述引物序列中R=（A/G），H=A/T/C。