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一种适用于呋喃唑酮残留分析的酶联免疫检测试剂盒及应用

申请公布号:CN100498337C

申请号:CN200510086346.9

申请日期:2005.09.02

申请公布日期:2009.06.10

申请人:
华中农业大学

发明人:袁宗辉;常超;王玉莲;赵春保;王帅兵;高爱中;陈冬梅;陶燕飞;伍金娥;彭大鹏

分类号:G01N33/543(2006.01)I;G01N33/531(2006.01)I

主分类号:G01N33/543(2006.01)I

代理机构:
北京路浩知识产权代理有限公司

代理人:张红兵

地址:430070湖北省武汉市洪山区狮子山街1号

摘要:本发明公开了一种适用于呋喃唑酮残留分析的酶联免疫检测试剂盒及其应用,属于免疫化学分析技术领域。本发明所提供的试剂盒主要由3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)特异性抗体、AOZ标准溶液、包被有AOZ与卵清蛋白复合物的酶标板组成。样品处理经盐酸水解,释放AOZ,苯甲醛衍生过夜,MAX柱净化,采用间接竞争ELISA方法检测动物可食性组织如肝脏、肌肉中AOZ残留。本发明的核心技术包括人工抗原的合成、抗体的制备、ELISA方法的建立、ELISA试剂盒的组装等。本发明的试剂盒具有简便、快速、灵敏、准确、廉价的优点,能同时快速检测大批样品,最低检测限0.1μg/kg。

主权项:1、一种适用于呋喃唑酮残留分析的酶联免疫检测试剂盒,它包括盒体、设在盒体内的酶标板、试剂,所述的试剂包含洗涤液、样品稀释液、辣根过氧化酶标记羊抗兔抗体、底物显色A液、底物显色B液和终止液,其中所述的显色A液是过氧化氢或过氧化脲,所述的底物显色B液是四甲基联苯胺或邻苯二胺,其特征在于,酶标板的每孔内包被有能与呋喃唑酮残留标示物3-氨基-2-恶唑烷酮特异性抗体结合的包被抗原,所述的包被抗原是由3-氨基-2-恶唑烷酮与对醛基苯甲酸反应,再与卵清蛋白偶联的复合物,试剂还包含3-氨基-2-恶唑烷酮标准溶液和3-氨基-2-恶唑烷酮抗体液,该抗体液是由人工免疫原免疫家兔得到的血清,其中的人工免疫原是由3-氨基-2-恶唑烷酮与对醛基苯甲酸反应,再与牛血清蛋白偶联的复合物。

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